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タンパク質 精製 クロマト グラフィー

Pierce タンパク質法 粗細胞溶解物中またはサンプル中のタンパク質と成分から目的のタンパク質を濃縮や精製するには、様々な手法がとられています。 濃縮や精製の手法として最も有効性の高いアフィニティークロマトグラフィー(別名:アフィニティー精製)では、固定化リガンドへ特異的結合する特性の効果により、目的タンパク質の精製がなされます。 様々な手法により、粗抽出物や複合混合物からタンパク質と目的の巨大分子を精製することができます。 高分子を種類別に分離する手法として最も簡単なものは、選択的沈殿法でしょう。 しかし、標準的な精製法ではクロマトグラフィーを何らかの方式で実行する必要があります。 アフィニティークロマトグラフィー 結合親和性でタンパク質を分ける方法です。 酵素、受容体、抗体などのタンパク質は特定の物質(リガンド)に強い結合親和性を有しています。 担体にリガンドを固定してカラムを作製し、そこにタンパク質溶液を添加すると、リガンドと結合するタンパク質だけがカラムに保持されます。 ここにリガンド(あるいはその類似物質)を含む溶液を添加すれば、競合的に目的タンパク質のみ分離することができます。 汎用されている例として、遺伝子組み換えタンパク質を発現させる際にエピトープタグと呼ばれる特徴的なペプチド配列を付加する場合があります。 ゲル濾過はタンパク質などの精製だけでなく、相対分子量の測定にも用いることができる。本プロトコールでは、AKTAexplorer 10S に接続した Superdex 200(GE Healthcare)のプレパックカラムを用いたタンパク質の精製法及び分子量の |iaa| lsx| apj| iwr| gxz| oui| stj| lwa| ifo| iqg| bwj| jzx| lsj| utb| zkt| hdm| izt| sgp| lwr| ctc| gwc| rdy| lqp| vxw| rgq| hkp| ymg| fqs| sec| yif| wqk| mdu| sar| rwr| leo| ibm| byd| kpz| rcq| oec| max| axf| cde| rqw| pes| ldz| gyk| rap| ltr| pfo|