接着 培養
接着細胞とは、培養容器に付着しながら増殖する細胞のことです。 付着細胞とも呼ばれます。 一方で、培地中で浮遊した状態で増殖する培養細胞は浮遊細胞と呼ばれます。 培養細胞は、一般的に生体で存在していた状況を反映するよう培養を行います。 生物の体内で血液中に存在して血管内を流れていた細胞は浮遊系細胞、組織に付着していた細胞は接着系細胞として培養します。 接着細胞の培地交換は、培地を吸引して、新しい培地を添加することにより行います。 培養容器の中である程度まで細胞が増殖したら、細胞容器表面から細胞を分散液を用いて剥離し回収したのち、適切な細胞数でまき直しを行います。 関連用語 細胞増殖曲線 細胞培養(セルカルチャー) hPSC(ヒト多能性幹細胞) ヒト人工多能性幹細胞(ヒトiPS細胞)
接着細胞の良好な接着を阻む環境ストレスには以下のものがあります。. コンタミネーション. インキュベーターの温度変動. 不十分または不適切な培養容器表面/基質. 不適切な環境ガスの混入. 上記をすべて否定できる場合、細胞が接着して単層膜を形成
接着細胞を含む培養容器 組織培養処理したフラスコ、プレートまたは培養皿 あらかじめ37℃に温めておいた、完全増殖培地 使い捨ての滅菌済15 mLチューブ 37℃の、加湿した5% CO2インキュベーター ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水(DPBS)などのカルシウム、マグネシウムまたはフェノールレッドを含まない平衡塩類溶液 トリプシンまたは TrypLE Express などのフェノールレッドを含まない解離試薬 生細胞数および総細胞数を決定するための試薬および装置(Countess II 自動セルカウンターなど) 接着細胞の植え継ぎプロトコール 細胞に接触する溶液および機器はすべて滅菌する必要があります。 常に適切な無菌操作を実行し、実験は層流フード内で行ってください。
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